L’entrata di colesterolo nei mitocondri delle cellule produttrici di steroidi è la fase determinante della velocità nella steroidogenesi.

Numerosi studi hanno dimostrato che la proteina del traslocatore legante il colesterolo (18 kDa TSPO) svolge un ruolo importante nella traslocazione del colesterolo nei mitocondri e che potrebbe anche agire sull'omeostasi del colesterolo.

Diversi ligandi specifici per TSPO hanno dimostrato di aumentare la produzione di steroidi in vitro e in vivo.

Lo studio che presento ha valutato gli effetti del ligando TSPO FGIN ‐ 1‐27 sull'accumulo di colesterolo e sulla formazione di goccioline lipidiche in relazione alla formazione di steroidi.

 

 

Materiali e metodi

Utilizzando cellule di Leydig primarie, sono stati usati metodi immunocitochimici e molecolari per esaminare l'accumulo di colesterolo, la formazione di goccioline lipidiche e la formazione di steroidi in risposta a LH e FGIN-1‐27.

Inoltre, sono stati determinati gli effetti del knockout Tspo di CRISPR / Cas9 e dei knockdown siRNA di Tspo e Plin2 (Perilipin 2; noto anche come proteina correlata alla differenziazione adiposa, ADFP) sulla steroidogenesi indotta da LH e FGIN ‐ 1‐27.

 

Risultati

In risposta a LH e FGIN ‐ 1‐27, le cellule MA-10 coltivate e le cellule di Leydig primarie hanno aumentato la formazione di steroidi, l'accumulo di colesterolo e la formazione di goccioline lipidiche.

L'accumulo di colesterolo nelle goccioline lipidiche è stato aumentato anche nelle cellule knockout Tspo. Il knockout di Tspo o il suo knockdown nelle cellule MA ‐ 10 hanno comportato una ridotta formazione di progesterone in risposta a entrambi LH e FGIN ‐ 1‐27, così come il knockdown di Plin2.

Anche la produzione di steroidi è stata inibita dal dietilumbelliferil fosfato (DEUP), inibitore dell'estere idrolasi di colesterolo.

 

Discussione e conclusioni

Questi risultati supportano la conclusione che FGIN ‐ 1‐27 stimola la formazione di steroidi aumentando la traslocazione del colesterolo mediata da TSPO nei mitocondri interni per la steroidogenesi, nonché nel citosol per la formazione di goccioline lipidiche.

FGIN ‐ 1‐27 ha anche aumentato la formazione di steroidi almeno in parte inducendo la conversione dell'estere di colesterolo presente nelle goccioline lipidiche in colesterolo, rendendo così disponibile più substrato per la formazione di steroidi.

 

https://doi.org/10.1111/andr.12733